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至寶多肽急性毒性實驗[斯貝福（北京）生物科技有限公司]
研究報告
1 實驗目的
開展該樣品的急性毒性實驗，確定最大給樣品量。
2 實驗動物
小鼠，體重18-22g,品系ICR,來源斯貝福（北京）生物科技有限公司。
3 動物分組
共40只動物，隨機分為兩組，雌雄各半，一組為給樣品組，一組為對照組。
4 樣品濃度及劑量
4.1給樣品組:樣品濃度：0.75g/ml；單次給樣品體積：0.8ml/20g；24h給樣品次數：3次。
4.2對照組：蒸餾水，體積及次數同上。
5 觀察時間
共觀察14天。
6 觀察指標
6.1死亡只數：記錄各組死亡的只數及時間。
6.2體重：灌胃前，灌胃第三天，第七天，第14天秤體重。死亡的小鼠在死亡時間秤體重。
6.3攝食量：每天記錄攝食量。
6.4第十四天處死動物，觀察各臟器有無異常。
7 統計學處理
數據以均數土標準差（平均數±S）表示，各組均數間比較釆用t檢驗。
8 最大耐受量試驗結果及分析
8.1一般情況
第1次給樣品后，立即觀察，給樣品組小鼠在給樣品后表現為活動減少，4h后逐漸恢復正常；第2次給樣品后給樣品組小鼠表現同上，4h恢復正常。對照組小鼠灌胃給予與制備樣品時相同體積的水后無異常反應；給樣品組小鼠給樣品24h后未見其他異常反應，實驗小鼠的皮膚、黏膜、毛色、眼睛、呼吸中樞神經系統、自主行為等正常，繼續觀察14天，每天觀察2次（8:00和20:00）,在觀察的中給樣品組小鼠同對照組小鼠一樣未出現叫聲異常、震顫、驚厥、運動失調、流涎、流淚、流鼻涕、呼吸困難、心跳過強或過弱、腹瀉便秘腸脹氣等現象，未見其他異常反應，給樣品組小鼠的皮膚、黏膜、毛色、眼睛、呼吸中樞神經系統自主行為等正常，給樣品14天內未岀現死亡情況。
8.2小鼠體重變化
對照組與給樣品組小鼠體質量增長比較無顯著性差異（P>0.05）,提示該樣品對小鼠的急性毒性反應不明顯。見（表1）
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表1用樣品期間小鼠的體重變化情況 |
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組別 |
體重 |
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給樣品前 |
給樣品后 3天 |
給樣品后7天 |
給樣品后 14天 |
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空白組 |
20.4±0.6 |
24.6±0.8 |
28.1±2.6 |
34.0±6.1 |
|
給 樣品組 |
20.2±0.4 |
22.2±0.9 |
27.4±2.3 |
31.8±3.7 |
8.3內臟結構觀察實驗第14天稱重后逐只處死并解剖，肉眼觀察肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、卵巢、子宮、精囊、前列腺、睪丸、胃、腸及胸腔腹腔，各器官均未出現體積顏色質地明顯改變。
8.4小鼠進食量變化
對照組與給樣品組小鼠進食量比較無顯著性差異(P>0.05),提示該樣品對小鼠的急性毒性反應不明顯。見(表2)
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表2用樣品期間小鼠的進食量變化情況 |
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序號 |
組別 |
進食量(g) |
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1 |
空白組 |
20.4±0.6 |
|
2 |
給樣品組 |
20.2±0.4 |
9 結論
本試驗中得樣品是制成混懸液，理論上可以達到很大的濃度，但試驗中發現過大的濃度會使灌胃器堵塞。經探索發現0.75g/ml的樣品水溶液既是眾多的試驗濃度的最大的的濃度又是剛好全齢混懸液通過灌胃器的濃度，符合試驗的要求，確定該0.75g/ml濃度為小鼠灌胃給樣品的最大濃度。該樣品對小鼠的最大耐受量90g/kg。以該樣品人每日服用量2g計算，最大耐受量為每日服用量的297倍。
中國中醫科學院中醫基礎理論研究所
2020月3月23日
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