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病原學(xué) 1概述 冠狀病毒屬于套式病毒目、冠狀病毒科、冠狀病毒屬，是一類(lèi)具有囊膜？基因組為線(xiàn)性單股正鏈的RNA病毒，是自然界廣泛存在的一大類(lèi)病毒。病毒基因組5′端具有甲基化的帽狀結(jié)構(gòu)，3′端具有poly(A)尾，基因組全長(zhǎng)約27-32kb，是目前已知RNA病毒中基因組最大的病毒。 冠狀病毒僅感染脊椎動(dòng)物，與人和動(dòng)物的多種疾病有關(guān)，可引起人和動(dòng)物呼吸道、消化道和神經(jīng)系統(tǒng)疾病。 2分類(lèi) 根據(jù)系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，冠狀病毒可分為四個(gè)屬：α、β、γ、δ，其中β屬冠狀病毒又可分為四個(gè)獨(dú)立的亞群A、B、C和D群。 01可感染人的冠狀病毒 迄今為止，除本次在武漢引起病毒性肺炎暴發(fā)疫情的新的冠狀病毒外，共發(fā)現(xiàn)6種可感染人類(lèi)的冠狀病毒(HCoV-229E、HCoV-OC43、SARS-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1和MERS-CoV)。 HCoV-229E和HCoV-NL63屬于α屬冠狀病毒，HCoV-OC43、SARS-CoV、HCoV-HKU1和MERS-CoV均為β屬冠狀病毒，其中，HCoV-OC43和HCoV-HKU1屬于A亞群，SARS-CoV屬于B亞群，MERS-CoV屬于C亞群(見(jiàn)下圖)。 02動(dòng)物冠狀病毒 包括哺乳動(dòng)物冠狀病毒和禽冠狀病毒。 哺乳動(dòng)物冠狀病毒主要為α、β屬冠狀病毒，可感染包括蝙蝠、豬、犬、貓、鼠、牛、馬等多種動(dòng)物。 禽冠狀病毒主要來(lái)源于γ、δ屬冠狀病毒，可引起多種禽鳥(niǎo)類(lèi)如雞、火雞、麻雀、鴨、鵝、鴿子等發(fā)病。
冠狀病毒系統(tǒng)發(fā)生樹(shù) 3理化特性 人冠狀病毒對(duì)熱較為敏感，病毒在4℃合適維持液中為中等穩(wěn)定，-60℃可保存數(shù)年，但隨著溫度的升高，病毒的抵抗力下降，如HCoV-229E于56℃10分鐘或者37℃數(shù)小時(shí)即可使喪失感染性，SARS-CoV于37℃可存活4天，56℃加熱90分鐘、75℃加熱30分鐘能夠滅活病毒。 人冠狀病毒不耐酸不耐堿，病毒復(fù)制的最適宜PH值為7.2。 人冠狀病毒對(duì)有機(jī)溶劑和消毒劑敏感，75%酒精、乙醚、氯仿、甲醛、含氯消毒劑、過(guò)氧乙酸和紫外線(xiàn)均可滅活病毒。 人冠狀病毒中SARS-CoV于室溫24℃條件下在尿液里至少可存活10天，在腹瀉病人的痰液和糞便里能存活5天以上，在血液中可存活約15天，在塑料、玻璃、馬賽克、金屬、布料、復(fù)印紙等多種物體表面均可存活2-3天。 流行病學(xué) 在全球，10%~30%的上呼吸道感染由HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63和HCoV-HKU1四類(lèi)冠狀病毒引起，在造成普通感冒的病因中占第二位，僅次于鼻病毒。感染呈現(xiàn)季節(jié)性流行，每年春季和冬季為疾病高發(fā)期。潛伏期2-5天，人群普遍易感。主要通過(guò)人與人接觸傳播。 SARS由人感染SARS-CoV引起，首先出現(xiàn)在我國(guó)廣東省部分地區(qū)，之后波及我國(guó)24個(gè)省、自治區(qū)、直轄市和全球其他28個(gè)國(guó)家和地區(qū)。2002年11月至2003年7月全球首次SARS流行中，全球共報(bào)告臨床診斷病例8096例，死亡774例，病死率9.6%。SARS的潛伏期通常限于2周之內(nèi)，一般約2～10天。人群普遍易感。SARS病人為最主要的傳染源，癥狀明顯的病人傳染性較強(qiáng)，潛伏期或治愈的病人不具備傳染性。自2004年以來(lái)，全球未報(bào)告過(guò)SARS人間病例。 MERS是一種由MERS-CoV引起的病毒性呼吸道疾病，于2012年在沙特阿拉伯首次得到確認(rèn)。自2012年起，MERS在全球共波及中東、亞洲、歐洲等27個(gè)國(guó)家和地區(qū)，截止目前共報(bào)告2468例病例，死亡851例，病死率約34.4%。80%的病例來(lái)自沙特阿拉伯。我國(guó)曾發(fā)生過(guò)一例輸入性MERS病例。該病潛伏期為2-14天，人群普遍易感。單峰駱駝是MERS-CoV的主要儲(chǔ)存宿主，且為人間病例的主要傳染來(lái)源，人與人之間傳播能力有限，目前僅發(fā)現(xiàn)在醫(yī)療機(jī)構(gòu)中，如果密切接觸病人時(shí)未采取有效防護(hù)，可能會(huì)出現(xiàn)人際傳播現(xiàn)象。 臨床表現(xiàn) 常見(jiàn)的可感染人類(lèi)的冠狀病毒(包括229E、NL63、OC43和HKU1型)通常會(huì)引起輕度或中度的上呼吸道疾病，如感冒。癥狀較輕，主要包括流鼻涕、頭痛、咳嗽、咽喉痛、發(fā)熱等。有時(shí)會(huì)引起下呼吸道疾病，例如肺炎或支氣管炎，心肺疾病患者、免疫力低下人群、嬰兒和老年人中較常見(jiàn)。 MERS-CoV和SARS-CoV常可引起嚴(yán)重癥狀。MERS癥狀通常包括發(fā)熱、咳嗽和呼吸急促，甚至發(fā)展為肺炎，病死率約為34.4%。SARS癥狀通常包括發(fā)熱、畏寒和身體疼痛，甚至發(fā)展為肺炎，病死率約為9.6%。 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法 已知的6種可感染人類(lèi)的冠狀病毒中，中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-CoV)和嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS-CoV)所致疾病的嚴(yán)重程度以及社會(huì)影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)其它冠狀病毒，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法相對(duì)較為成熟。 中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS-CoV) 病原學(xué)檢測(cè)主要包括病毒分離、病毒核酸檢測(cè)。病毒分離為實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。病毒核酸檢測(cè)可以用于早期診斷。應(yīng)及時(shí)留取多種標(biāo)本(咽拭子、鼻拭子、鼻咽或氣管抽取物、痰或肺組織，以及血液和糞便)進(jìn)行檢測(cè)，其中以下呼吸道標(biāo)本陽(yáng)性檢出率更高。 1.病毒核酸檢測(cè)(PCR)。以RT-PCR(最好采用real-timeRT-PCR)法檢測(cè)呼吸道標(biāo)本中的MERS-CoV核酸。 2.病毒分離培養(yǎng)。可從呼吸道標(biāo)本中分離出MERS-CoV，但一般在細(xì)胞中分離培養(yǎng)較為困難。 嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS-CoV) 1.SARS-CoVRNA檢測(cè)：SARS-CoVRNA陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)為PCR檢測(cè)結(jié)果符合下列三項(xiàng)之一者可判斷為陽(yáng)性。 (1)至少需要兩個(gè)不同部位的臨床標(biāo)本檢測(cè)陽(yáng)性(例如鼻咽分泌物和糞便)。 (2)收集至少間隔2天的同一種臨床標(biāo)本送檢檢測(cè)陽(yáng)性(例如2份或多份鼻咽分泌物)。 (3)在每一個(gè)特定檢測(cè)中對(duì)原臨床標(biāo)本使用兩種不同的方法，或從原標(biāo)本新提取RNA開(kāi)始重復(fù)PCR檢測(cè)陽(yáng)性。 PCR檢測(cè)結(jié)果的確認(rèn)：①使用原始標(biāo)本重復(fù)PCR試驗(yàn)；②在第二個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)同一份標(biāo)本。 2.SARS-CoV特異性抗原N蛋白檢測(cè) 定性檢測(cè)血清或血漿標(biāo)本中SARS-CoV核衣殼(N)抗原，用于SARS-CoV感染的早期輔助診斷。 3.SARS-CoV特異性抗體檢測(cè)：特異性抗體檢測(cè)診斷SARS標(biāo)準(zhǔn)為符合以下兩者之一即可診斷為SARS。 (1)平行檢測(cè)急性期血清抗體和恢復(fù)期血清抗體發(fā)現(xiàn)抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)。 (2)平行檢測(cè)急性期血清抗體和恢復(fù)期血清抗體發(fā)現(xiàn)抗體滴度升高≥4倍。 |
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